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病毒保存液病毒滅活效果檢測

病毒保存液病毒滅活效果檢測

更新時間:2022-06-24

訪問量:2630

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

生產(chǎn)地址:全國

簡要描述:
中科檢測可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測,病毒保存液檢測可針對不同保存溫度、不同保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。

病毒保存液適用于病毒、流感病毒、手足口病毒等常見病毒樣本采集保存運(yùn)輸工作,是采樣管內(nèi)浸末采樣拭子病毒樣本一種保護(hù)病毒的被檢測物質(zhì)的液體,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本,儲存的樣本可用于后續(xù)的核酸提取或純化等臨床實(shí)驗(yàn)。


病毒保存液通常分為兩種,一種是非滅活型,能夠保護(hù)病毒的蛋白和核酸,另一種是滅活型,通常含有滅活病毒的裂解鹽,裂解蛋白而保護(hù)核酸。


滅活型病毒保存液:主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測樣本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止感染,同時又含有Rnase酶抑制劑,能保護(hù)病毒核酸不被降解,后續(xù)的NT-PCR實(shí)驗(yàn)只要能檢測出病毒的核酸即可以做出診斷。而且能在常溫下保存相對較長的時間。


非滅活型保存液:主要是以運(yùn)送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液型保存液。這一種是同時保留了病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者RNA,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時也有一定的感染性風(fēng)險。采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫。


中科檢測可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測,病毒保存液檢測可針對不同保存溫度、不同保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。


病毒保存液檢測方法

1. 試驗(yàn)對象:

毒株:甲型流感病毒HINI (VR- 1469)

細(xì)胞: MDCK細(xì)胞.


2.試驗(yàn)步驟:

1)取樣品病毒保存液(非滅活型) 9.8mL,加入0.2mL病毒原液混勻,分裝若干測試液,存至要求溫度;

2)保存至對應(yīng)天數(shù)后取出測試液,檢測病毒滴度;

a)10倍倍比稀釋測試液;

b)將稀釋液加入含生長至單層的MDCK細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上,并設(shè)置正常對照組,加等量培養(yǎng)液;

c)置于35'C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育60 min后棄去上清液,加入雙抗400 IU/mL的維持培養(yǎng)液繼續(xù)孵育3~5天,每天觀察細(xì)胞增長狀況;

d)當(dāng)接種病毒的MDCK細(xì)胞出現(xiàn)變圓或縮小等病變現(xiàn)象時,記錄產(chǎn)生細(xì)胞病變的情況;

e)根據(jù)Reed-Muench公式計算半數(shù)感染量TCID50。


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